a. 清洗與再生

  如果發(fā)生峰形改變、峰分叉、出現(xiàn)肩峰、保留時(shí)間改變、分離度變化或柱壓升高，說明色譜柱可能已被污染。通常情況下，用純有機(jī)溶劑進(jìn)行沖洗（小心避免緩沖液出現(xiàn)沉淀）就足以去除污染物。如果沖洗不能解決問題，可采用以下清洗和再生步驟灌注色譜柱。請(qǐng)根據(jù)樣品和/或您認(rèn)為污染色譜柱的物質(zhì)的性質(zhì)，選擇與之匹配的常規(guī)清洗方法（見表3）。用20倍柱體積（例如對(duì)于4.6×250 mm色譜柱，使用80 mL溶劑）HPLC級(jí)溶劑沖洗色譜柱。將流動(dòng)相溫度升至35℃~55℃可以提高清潔效率。

表3：色譜柱清洗溶劑使用順序和其他選項(xiàng)

  保護(hù)柱需要根據(jù)樣品污染情況定期更換。當(dāng)系統(tǒng)背壓穩(wěn)步上升至設(shè)定壓力限值時(shí)，通常表明需要更換保護(hù)柱。突然出現(xiàn)分叉峰也表明需要更換保護(hù)柱。

b. 存放

  為了盡可能延長色譜柱壽命和提高性能，使用色譜柱之后請(qǐng)用100％乙腈保存保存色譜柱。請(qǐng)勿使用含緩沖液或鹽的水性流動(dòng)相保存色譜柱。如果流動(dòng)相洗脫液中含有酸/堿性添加劑、緩沖液或鹽，請(qǐng)先用至少10倍柱體積（常用色譜柱的柱體積見表1）HPLC級(jí)水沖洗色譜柱，再用至少15倍柱體積HPLC級(jí)100%乙腈沖洗色譜柱，然后再儲(chǔ)存。如果不執(zhí)行這些步驟，可能導(dǎo)致緩沖鹽在色譜柱內(nèi)沉淀。使用隨附的端塞完全密封色譜柱，防止溶劑蒸發(fā)導(dǎo)致柱床變干。

  注：如果色譜柱運(yùn)行了含甲酸鹽（如甲酸銨、甲酸等）的流動(dòng)相，并且之后使用100%乙腈進(jìn)行沖洗，那么在重新安裝色譜柱并再次運(yùn)行含甲酸鹽的流動(dòng)相時(shí)，柱平衡花費(fèi)的時(shí)間可能略長。